Polybrene，也称为Hexadimethrine Bromide，是一种多聚阳离子聚合物，广泛应用于生物医学研究领域。它主要用作基因转染增强剂，尤其是在逆转录病毒和慢病毒介导的基因转染中效果显著。Polybrene的作用机理可能是通过中和细胞表面唾液酸与病毒颗粒之间的静电排斥，从而促进病毒颗粒与细胞的吸附作用。

在病毒介导的细胞转染中，它能显著提高慢病毒和腺病毒等对哺乳动物细胞的感染效率。此外，Polybrene在DNA转染实验中也能增强脂质体的转染效率，为基因功能研究和基因治疗提供支持。它还作为一种抗肝素剂，用于中和红细胞表面的负电荷，制备非特异性凝集的红细胞。在蛋白测序领域，Polybrene通过增加多肽的降解和提高PVDF膜的亲水性，有助于降低测序过程中多肽的机械损伤，从而改善测序结果。这些多样化的应用使Polybrene成为实验室中不可或缺的工具。

Polybrene的使用浓度需根据细胞类型优化，一般建议在2至10μg/mL，常用浓度为5至8μg/mL。使用前，应查阅文献或进行预实验以确定最适合的浓度。鉴于Polybrene对某些细胞株可能有毒，尤其是分化的神经元和树突状细胞，使用前应进行毒性测试。此外，由于Polybrene可能对人体有害，操作时须穿戴适当的防护服和手套，避免直接接触和吸入。关于储存，Polybrene在-20℃下建议分装保存，以保持活性长达两年以上，避免多次冻融。

产品应用介绍

Polybrene在慢病毒感染中的应用

  01.细胞接种

首先，在24孔板（根据实验需求选择合适大小的培养容器）中按照实验需求铺板细胞，确保第二天细胞密度约为50-70%，并在37℃条件下培养过夜。

02.病毒准备

第二天，从-80℃冰箱取出慢病毒，置于冰浴中融化。根据文献或预实验结果，使用新鲜完全培养基将病毒稀释至适当的MOI浓度。切记轻柔混匀，避免使用振荡器以免破坏病毒粒子。

注：MOI值=病毒滴度（TU/mL）×病毒体积（mL）/细胞个数

03.感染过程

将细胞原有的培养基吸去，加入预先稀释好的病毒液、培养基和Polybrene轻轻摇匀，并在37℃下培养过夜。制备混合液时，请按以下顺序：首先加入预热至37°C的完全培养基，接着加入病毒液混匀，最后加入Polybrene至所需终浓度（通常为2-10μg/ml，具体浓度可能因细胞类型而异，请查阅相关文献）。

注：对于某些细胞如Jurkat、kasumi、NB4、H929、GBC-SD、MCF-7等，以及大部分原代细胞，通常不建议添加Polybrene。

04.换液培养

感染48小时后，将含有病毒的培养基吸除，并替换为新鲜培养基。若感染后24h观察细胞生长受到抑制，也可在24h更换新的完全培养基。

05检测分析

继续培养细胞24至48小时，然后根据实验需求收集细胞，以检测目的蛋白的表达情况。

06稳转细胞株筛选（可选）

确定目的蛋白成功表达后，可根据载体抗性（puro、neo、Hygromycin B），加入对应的筛选药物；初次构建，需要先对目的细胞进行最佳筛选药物浓度测试，确定筛选药物添加量；可根据实验需求，进行pool或minipool筛选。

翌圣生物的聚凝胺（Polybrene）以其卓越的品质，已经成为科研领域中不可或缺的工具。自推出以来，它已经助力科研人员发表了68篇科研论文，这些论文的总影响因子累计达到545.607。这些成果发表在包括《Cell Discovery》、《Cell Metabolism》和《Journal of Extracellular Vesicles》等知名期刊上。这一数据不仅证明了聚凝胺在科研中的重要地位，也反映了其在提升实验效率和成功率方面的显著作用。

部分参考文献（使用翌圣Polybrene发表）

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2、Wu S, Wang S, Lin X, et al. Lanatoside C inhibits herpes simplex virus 1 replication by regulating NRF2 distribution within cells. Phytomedicine. 2024;124:155308. doi:10.1016/j.phymed.2023.155308（IF=7.9）

3、Chen S, Chen G, Xu F, et al. Treatment of allergic eosinophilic asthma through engineered IL-5-anchored chimeric antigen receptor T cells. Cell Discovery. 2022;8:80. doi.org/10.1038/s41421-022-00433-y（IF=38.079）

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