Hieff NGSTM Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module
快速末端修复/A尾添加模块
产品信息

    

        

            

            
产品名称
            
            

            
产品编号
            
            

            
规格
            
            

            
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价格（元）
            
        
        

            

            
Hieff NGSTM Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module
            
快速末端修复/A尾添加模块
            
            

            
12608ES24*
            
            

            
24T
            
            

            
-20℃
            
            

            
3865.00
            
        
        

            

            
12608ES96*
            
            

            
96T
            
            

            
-20℃
            
            

            
11765.00 
            
        
    

产品描述
Hieff NGSTM Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module是针对Illumina®高通量测序平台文库构建而专业设计的DNA末端修复/A尾添加模块，具有高效、快速、易实现自动化的优势。本产品兼容1 ng-1 μg片段化Input DNA，可在单管内实现片段化DNA的末端补平、5端磷酸化和3端加A尾反应，得到5末端含磷酸基团且3末端带有dA突出的DNA产物。该产物无需纯化，即可使用Hieff NGSTM Fast-Pace DNA Ligation Module（Cat#12607）进行文库构建接头连接反应。
本产品已与Hieff NGSTM Fast-Pace DNA Ligation Module（Cat#12607），2×Hieff CanaceTM High-Fidelity PCR Master Mix（Cat#12620）共同用于DNA文库构建，通过Illumina®高通量平台测序验证其有效性。本产品中提供的所有试剂组分均经过严格质检，最高程度保障产品优异性能与批间稳定性。
产品组分

    

        

            

            
组分名称
            
            

            
24 T
            
            

            
96 T
            
        
        

            

            
End Repair/dA-Tailing Buffer
            
            

            
144 μL
            
            

            
576 μL
            
        
        

            

            
End Repair/dA-Tailing Enzyme
            
            

            
96 μL
            
            

            
384 μL
            
        
    

质量控制
Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Enzyme 
1. SDS-PAGE纯度：>95%。
2. 核酸内切酶活性：50 μL反应体系中加入10 μL本酶和1 μg φX174 RF I DNA，37°C孵育4小时。经琼脂糖凝胶电泳检测,RF II转化比率<10%。
3. 磷酸酶活性：在磷酸酶活性检测缓冲液中加入10 μL本酶和2.5 mM对**苯磷酸，37°C孵育4小时。经光谱测定法检测，405 nm处无对**苯阴离子特征吸收峰。
4. 功能活性：在1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Enzyme中加入1 μL本酶和0.5 μg包含5和3突出末端的片段化DNA，25°C孵育20分钟。经毛细管电泳检测，末端修复、加dA尾并磷酸化的DNA比率>95%。
Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer
1. 16小时孵育检测：50 μL反应体系中包含1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer和1 μg HindIII-λDNA，37°C孵育16小时。经琼脂糖凝胶电泳检测，条带无降解；50 μL反应体系中包含1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer和1 μg T3 DNA，37°C孵育16小时。经琼脂糖凝胶电泳检测，条带无降解。
2. 核酸内切酶活性：50 μL反应体系中包含1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer和1 μg φX174 RF I DNA，37°C孵育4小时。经琼脂糖凝胶电泳检测，RF II转化比<10%。
3. RNase活性：在1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer中加入40 ng FAM-RNA，37°C孵育16小时。经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，条带无降解。
4. 磷酸酶活性：在磷酸酶活性检测缓冲液中加入1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer和2.5 mM对**苯磷酸，37°C下孵育4小时。经光谱测定法检测，405 nm处无对**苯阴离子特征吸收峰。
测序验证
本品与Hieff NGSTM Fast-Pace DNA Ligation Module（Cat#12607），2×Hieff CanaceTUNEology 波长可调检测卡盒-->