产品信息

产品描述

疏水作用层析（hydrophobic interaction chromatography，HIC）是利用生物分子所带有的疏水基团和固定相上的疏水配基之间的相互作用来分离物质的一种层析方法，盐离子可以破坏生物分子表面的水化膜，促进疏水基团和配基之间的结合。

本品Phenyl Agarose FF(LS)是一种高取代的芳香族疏水层析介质，它是在 6%的琼脂糖基架上偶联苯基而成的，结合载量相对Phenyl Agarose FF(HS)较低，配基疏水性强，适合疏水性较弱的生物分子的分离纯化。

产品性质

运输和保存方法

冰袋运输。4-30℃保存，有效期4年。

注意事项

1）请勿冷冻保存本产品。

2）填料使用前一定要充分颠倒若干次，使琼脂糖珠混合均匀。

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

4）本产品仅作科研用途！

使用方法

1 缓冲液的准备

1）所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

2）结合缓冲液通常选用含有高浓度盐的磷酸盐缓冲液，如20 mM PB，1.5 M (NH₄)₂SO₄，pH7.0。

3）洗脱缓冲液通常选用不含其他盐类的磷酸盐缓冲液，如50 mM PB，pH7.0，对于较难洗脱的物质可以采用纯水，或者在纯水中加入低浓度乙醇作为洗脱液。

注：需要根据后续的实验结果（目的物是否有沉淀、目的物的结合强弱、回收率、分离度等） 对结合缓冲液中的盐的浓度和类型进行调整。

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤，减少杂质，提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。需要将样品的 pH 和电导率调整到与结合缓冲液一致。

3 样品纯化

1）将介质装入合适的层析柱，用3-5倍柱体积的去离子水冲洗出储存缓冲液，然后用5倍柱体积的结合Buffer进行平衡，使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。

2）将样品加到平衡好的Phenyl Agarose FF(LS)中，收集流出液。

3）用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。

4）使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer，收集洗脱液，即目的蛋白组分。

5）依次使用3倍柱体积的结合Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料，最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡，然后保存在等体积的20%TUNEology 波长可调检测卡盒-->