 
        Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina® “一步法”DNA建库试剂盒12203ES
产品名称: Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina® “一步法”DNA建库试剂盒12203ES
英文名称: Hieff  NGSTM OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina
产品编号: 12203ES08
产品价格: 询价
产品产地: Yeasen
品牌商标: Yeasen
更新时间: 2024-12-10T13:18:22
使用范围: null
- 联系人 : 李自转
- 地址 : 上海市浦东新区天雄路166弄一号楼三层南单元
- 邮编 : 200030
- 所在区域 : 上海
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Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina®
“一步法”DNA建库试剂盒
Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina®
“一步法”DNA建库试剂盒
产品信息
    
        
            
            
             
            
            产品编号
             
            
            规格
             
            
            价格(元)
             
         
        
            
            Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina®
            “一步法”DNA建库试剂盒
             
            
            12203ES08
             
            
            8 T
             
            
            3683.00
             
         
        
            
            12203ES24
             
            
            24 T
             
            
            7583.00
             
         
        
            
            12203ES96
             
            
            96 T
             
            
            28663.00
             
         
    
| 产品编号 | 规格 | 价格(元) | |
| Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina® “一步法”DNA建库试剂盒 | 12203ES08 | 8 T | 3683.00 | 
| 12203ES24 | 24 T | 7583.00 | |
| 12203ES96 | 96 T | 28663.00 | 
产品描述
Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina®是针对Illumina®高通量测序平台专业开发设计的新一代酶切法建库试剂盒。与传统的建库法比较,本品采用高质量的片段化酶,摆脱了繁琐的超声过程,同时简化了操作流程,将片段化模块与末端修复模块合二为一,极大的降低了建库的时间和成本。本试剂盒具有优秀的文库转化率,可应用于常规动植物基因组、微生物基因组等样本,同时能兼容FFPE DNA样本的建库。经测序验证,不同GC含量的样本,均可获得优异的测序结果,文库覆盖度高,均一性好,偏好性低,使建库变得更加简单高效。
Ø 适用500 pg-1 μg的基因组DNA、全长cDNA等样本
Ø 高质量片段化酶,可随机切割双链DNA,酶切片段无偏好性
Ø 片段化、末端修复/加A一步完成
Ø 强扩增效率的高保真酶,显著提高文库质量及产量
Ø 适用于FFPE DNA样本
Ø 严格的批次性能与稳定性质控
Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina®是针对Illumina®高通量测序平台专业开发设计的新一代酶切法建库试剂盒。与传统的建库法比较,本品采用高质量的片段化酶,摆脱了繁琐的超声过程,同时简化了操作流程,将片段化模块与末端修复模块合二为一,极大的降低了建库的时间和成本。本试剂盒具有优秀的文库转化率,可应用于常规动植物基因组、微生物基因组等样本,同时能兼容FFPE DNA样本的建库。经测序验证,不同GC含量的样本,均可获得优异的测序结果,文库覆盖度高,均一性好,偏好性低,使建库变得更加简单高效。
Ø 适用500 pg-1 μg的基因组DNA、全长cDNA等样本
Ø 高质量片段化酶,可随机切割双链DNA,酶切片段无偏好性
Ø 片段化、末端修复/加A一步完成
Ø 强扩增效率的高保真酶,显著提高文库质量及产量
Ø 适用于FFPE DNA样本
Ø 严格的批次性能与稳定性质控
产品组分
    
        
            
            组分编号与名称
             
            
            12203ES08
             
            
            12203ES24
             
            
            12203ES96
             
         
        
            
            12203-A
             
            
            
  
             
            
            Smearase® Mix
             
            
            80 μL
             
            
            240 μL
             
            
            960 μL
             
         
        
            
            12203-B
             
            
            
  
             
            
            Ligation Enhancer
             
            
            240 μL
             
            
            720 μL
             
            
            4×720 μL
             
         
        
            
            12203-C
             
            
            
  
             
            
            Fast T4 DNA Ligase
             
            
            40 μL
             
            
            120 μL
             
            
            480 μL
             
         
        
            
            12203-D
             
            
            
  
             
            
            2×Super Canace®Ⅱ High-Fidelity Mix
             
            
            200 μL
             
            
            600 μL
             
            
            4×600 μL
             
         
        
            
            12203-E
             
            
            
  
             
            
            Primer Mix
             
            
            40 μL
             
            
            120 μL
             
            
            480 μL
             
         
    
| 组分编号与名称 | 12203ES08 | 12203ES24 | 12203ES96 | ||
| 12203-A | 
 | Smearase® Mix | 80 μL | 240 μL | 960 μL | 
| 12203-B | 
 | Ligation Enhancer | 240 μL | 720 μL | 4×720 μL | 
| 12203-C | 
 | Fast T4 DNA Ligase | 40 μL | 120 μL | 480 μL | 
| 12203-D | 
 | 2×Super Canace®Ⅱ High-Fidelity Mix | 200 μL | 600 μL | 4×600 μL | 
| 12203-E | 
 | Primer Mix | 40 μL | 120 μL | 480 μL | 
运输与保存方法
冰袋运输。所有组分-20°C保存,有效期1年。
冰袋运输。所有组分-20°C保存,有效期1年。
注意事项
一、关于操作
1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 请于使用前将试剂盒各组分置于室温解冻。解冻后上下颠倒数次充分混匀,短暂离心后置于冰上待用。
3. 配制各步骤反应液时推荐使用移液器吹打混匀或轻轻振荡,剧烈振荡可能会造成文库产出下降。
4. 为避免样品交叉污染,推荐使用带滤芯的枪头,吸取不同样品时请更换枪头。
5. 推荐在带热盖的PCR仪中进行各步骤反应,使用前应预热PCR仪至反应温度附近。
6. PCR产物因操作不当极容易产生气溶胶污染,进而影响实验结果准确性。推荐将PCR反应体系配制区和PCR产物纯化检测区进行强制性的物理隔离;使用专用的移液器等设备;并定时对各实验区域进行清洁(使用0.5%次**钠或10%漂白剂进行擦拭清理),以保证实验环境的洁净度。
二、关于DNA片段化
1. 本试剂盒兼容范围为500 pg – 1 μg Input DNA。应尽可能使用A260/A280 = 1.8-2.0的高质量Input DNA。
2. 若Input DNA中引入高浓度金属离子螯合剂或其他盐,可能会影响后续实验,建议将DNA稀释在ddH2O或不含EDTA的10 mM Tris Buffer (pH 7.5-8.0)中进行片段化。
3. 对于常规的高质量基因组DNA,酶切时间参考表5,本试剂盒片段化偏好低,耐受各种GC含量的模板。对于不同降解程度的FFPE样本,酶切时间参考表6。以上为推荐时间,需客户在自己的实验体系中进行微调,以达到最佳效果。
4.为保证优质精确的片段化效果,片段化反应配制过程请于冰上操作。
5. 针对FFPE DNA建库,若样本质量不佳,客户对当前建库产量不满意,可选购我公司的FFPE DNA Repair Reagent (Cat#12606)对FFPE DNA进行修复,具体使用方法可参考此产品说明书。该试剂可与片段化末修加A过程同时进行,无需额外的操作。
三、关于接头连接(Adapter Ligation)
1. 针对Illumina®测序平台,Yeasen提供48种Barcoded Adapters: Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 1~Set 4(Cat#12615~Cat#12618);单端 96种 Index Primers: Hieff NGS® 96 Single Index Primers Kit for Illumina® , Set 1~Set 2 (Cat#12611~Cat#12612);双端 384 种 Index Primers: Hieff NGS® 384 Dual Index Primers Kit for Illumina® , Set 1~Set 2 (Cat#12613~Cat#12614)。
2. Adapter的质量和使用浓度直接影响连接效率及文库产量。Adapter用量过高可能会产生较多Adapter Dimer;用量较低可能会影响连接效率及文库产量。表1列举了使用本试剂盒,不同Input DNA量推荐的Adapter使用量。
表1  500 pg-1 μg Input DNA推荐的Adapter使用浓度
    
        
            
            Input DNA
             
            
            Adapter : Input DNA摩尔比
             
            
            Input DNA
             
            
            Adapter : Input DNA摩尔比
             
         
        
            
            1 μg
             
            
            10:1
             
            
            50 ng
             
            
            100:1
             
         
        
            
            500 ng
             
            
            20:1
                                    
                                
                            
                        
                    
                
            
        
        
        
        
            
                
                    
                        
                            
                        
                    
                
            
        
        
    
    
    
    
  
一、关于操作
1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 请于使用前将试剂盒各组分置于室温解冻。解冻后上下颠倒数次充分混匀,短暂离心后置于冰上待用。
3. 配制各步骤反应液时推荐使用移液器吹打混匀或轻轻振荡,剧烈振荡可能会造成文库产出下降。
4. 为避免样品交叉污染,推荐使用带滤芯的枪头,吸取不同样品时请更换枪头。
5. 推荐在带热盖的PCR仪中进行各步骤反应,使用前应预热PCR仪至反应温度附近。
6. PCR产物因操作不当极容易产生气溶胶污染,进而影响实验结果准确性。推荐将PCR反应体系配制区和PCR产物纯化检测区进行强制性的物理隔离;使用专用的移液器等设备;并定时对各实验区域进行清洁(使用0.5%次**钠或10%漂白剂进行擦拭清理),以保证实验环境的洁净度。
二、关于DNA片段化
1. 本试剂盒兼容范围为500 pg – 1 μg Input DNA。应尽可能使用A260/A280 = 1.8-2.0的高质量Input DNA。
2. 若Input DNA中引入高浓度金属离子螯合剂或其他盐,可能会影响后续实验,建议将DNA稀释在ddH2O或不含EDTA的10 mM Tris Buffer (pH 7.5-8.0)中进行片段化。
3. 对于常规的高质量基因组DNA,酶切时间参考表5,本试剂盒片段化偏好低,耐受各种GC含量的模板。对于不同降解程度的FFPE样本,酶切时间参考表6。以上为推荐时间,需客户在自己的实验体系中进行微调,以达到最佳效果。
4.为保证优质精确的片段化效果,片段化反应配制过程请于冰上操作。
5. 针对FFPE DNA建库,若样本质量不佳,客户对当前建库产量不满意,可选购我公司的FFPE DNA Repair Reagent (Cat#12606)对FFPE DNA进行修复,具体使用方法可参考此产品说明书。该试剂可与片段化末修加A过程同时进行,无需额外的操作。
三、关于接头连接(Adapter Ligation)
1. 针对Illumina®测序平台,Yeasen提供48种Barcoded Adapters: Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 1~Set 4(Cat#12615~Cat#12618);单端 96种 Index Primers: Hieff NGS® 96 Single Index Primers Kit for Illumina® , Set 1~Set 2 (Cat#12611~Cat#12612);双端 384 种 Index Primers: Hieff NGS® 384 Dual Index Primers Kit for Illumina® , Set 1~Set 2 (Cat#12613~Cat#12614)。
2. Adapter的质量和使用浓度直接影响连接效率及文库产量。Adapter用量过高可能会产生较多Adapter Dimer;用量较低可能会影响连接效率及文库产量。表1列举了使用本试剂盒,不同Input DNA量推荐的Adapter使用量。
表1  500 pg-1 μg Input DNA推荐的Adapter使用浓度
| Input DNA | Adapter : Input DNA摩尔比 | Input DNA | Adapter : Input DNA摩尔比 | 
| 1 μg | 10:1 | 50 ng | 100:1 | 
| 500 ng | 20:1 | 
